色譜法也叫層析法,它是一種高效能的物理分離技術(shù),將它用于分析化學(xué)并配合適當(dāng)?shù)臋z測手段,就成為色譜分析法。
判斷故障與故障排除的原則:1.確認(rèn)問題至少發(fā)生兩次以上。如果問題不重復(fù)出現(xiàn),很難證實其確實是問題;2.從最簡單的因素入手;3.一次只變化一個因素,以使你能夠確認(rèn)所變因素與問題之間的關(guān)聯(lián);4.恢復(fù)原狀。如果使用更換組件方法來查找問題之所在,完畢后應(yīng)將原有完好組件安裝回原處;5.養(yǎng)成記錄的好習(xí)慣。一個完整的好記錄是成功地進(jìn)行故障排除的原則。
色譜系統(tǒng)的反壓,流動相流經(jīng)管路及色譜柱時會有阻力,即,所謂的反壓, 又稱,系統(tǒng)壓力。Waters習(xí)慣用的壓力單位是Psi(磅/平方英吋),其它單位有:Bar,Mpa(1Bar=0.1Mpa=14.5Psi)。影響色譜系統(tǒng)反壓的因素:流動相的粘度是產(chǎn)生反壓的主要原因,粘度越大,反壓越高;流速對反壓的影響是線性關(guān)系,流速越大,反壓越高;溫度對反壓的影響是反比關(guān)系,溫度升高,反壓降低;反壓與色譜柱長度成正比;反壓與填料顆粒度的平方成反比;3.5μm填料比5μm填料反壓高;反壓與管路直徑的四次方成反比(1/D4);反壓與管路的長度成正比。
HPLC系統(tǒng)壓力問題分析:1.系統(tǒng)壓力高,可能的原因:溫度太低;流速太高;流動相粘度大;管路堵塞;儀器或色譜柱堵塞;壓力傳感器問題。2. 壓力低或沒有壓力,可能的原因:溫度太高;流速太低;泵關(guān)閉或保險絲斷了;泵未輸送流動相;系統(tǒng)內(nèi)有滲漏處;所用溶劑不正確;自動進(jìn)樣器在Purge時卡住。3.壓力不穩(wěn),可能的原因:壓力傳感器問題;泵排氣不充分;泵失效;流動相未正確脫氣;所用溶劑不混溶或易揮發(fā)。
---本文摘自實驗與分析